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發(fā)布時(shí)間:2024-05-21
關(guān)鍵詞:谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)
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來(lái)源:北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所
因業(yè)務(wù)調(diào)整,部分個(gè)人測(cè)試暫不接受委托,望見(jiàn)諒。
谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的檢測(cè)方法需要依據(jù)具體的應(yīng)用場(chǎng)景和所需的檢測(cè)精度來(lái)選擇,同時(shí)還需參照相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),如GB 25535-20105。在檢測(cè)過(guò)程中,可能還會(huì)使用到如高效液相色譜儀(HPLC)、氣相色譜儀(GC)、紫外-可見(jiàn)光譜儀等實(shí)驗(yàn)室儀器。
谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶是一種在多種生物體中廣泛存在的酶,它能夠催化蛋白質(zhì)多肽鏈之間或之內(nèi)的?;D(zhuǎn)移反應(yīng),從而促進(jìn)蛋白質(zhì)或肽之間的共價(jià)交聯(lián)129126。這種酶在食品工業(yè)中尤為重要,因?yàn)樗梢愿纳剖称返馁|(zhì)構(gòu)、提高蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、形成耐熱耐水的膜,以及提高食品的彈性和持水能力。
微生物來(lái)源的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶(MTGase)由于其易得性、反應(yīng)條件溫和以及不依賴鈣離子調(diào)節(jié)等優(yōu)點(diǎn),在蛋白質(zhì)的定點(diǎn)修飾中也得到了廣泛應(yīng)用。通過(guò)基因工程手段,可以在蛋白質(zhì)的特定部位引入MTGase特異性識(shí)別的標(biāo)簽,實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與小分子、蛋白質(zhì)、聚合物、糖類物質(zhì)和脂質(zhì)體之間的定點(diǎn)偶聯(lián),以及短肽的自身環(huán)化,這些修飾產(chǎn)物在藥物化學(xué)、化學(xué)生物學(xué)以及生物材料等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。
活性測(cè)定:檢測(cè)TGase的催化活性,這是評(píng)估TGase性能的基本指標(biāo)。
純度檢測(cè):評(píng)估TGase的純度,高純度的TGase在食品加工中更為安全有效。
熱穩(wěn)定性測(cè)試:由于TGase在食品加工中經(jīng)常面臨不同的溫度條件,因此其熱穩(wěn)定性是一個(gè)重要的檢測(cè)項(xiàng)目。
pH穩(wěn)定性測(cè)試:檢測(cè)TGase在不同pH值條件下的穩(wěn)定性,因?yàn)槭称芳庸み^(guò)程中pH值變化可能影響酶的活性。
底物特異性:研究TGase對(duì)不同底物的催化效率,這有助于了解其在特定食品加工過(guò)程中的應(yīng)用潛力。
毒性測(cè)試:進(jìn)行必要的毒性測(cè)試,以確保TGase作為食品添加劑的安全性。
微生物檢測(cè):確保TGase產(chǎn)品中不存在有害微生物,符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)。
重金屬和有毒元素檢測(cè):檢測(cè)TGase中可能存在的重金屬和其他有毒元素,以確保產(chǎn)品安全。
蛋白質(zhì)含量測(cè)定:檢測(cè)TGase中的蛋白質(zhì)含量,以評(píng)估其質(zhì)量。
比活性測(cè)定:比活性是單位質(zhì)量TGase的活性,是衡量TGase質(zhì)量的一個(gè)重要參數(shù)。
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA):這是一種常用的檢測(cè)方法,通過(guò)特異性抗體檢測(cè)TGase的存在和活性。
熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET):利用FRET技術(shù)可以檢測(cè)TGase催化的蛋白質(zhì)交聯(lián)反應(yīng)。
聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):通過(guò)SDS-PAGE可以觀察TGase催化的蛋白質(zhì)交聯(lián)后分子量的變化。
高效液相色譜法(HPLC):用于檢測(cè)TGase催化的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物,從而間接反映TGase的活性。
動(dòng)態(tài)光散射(DLS):用于檢測(cè)TGase催化形成的蛋白質(zhì)聚集體的大小分布。
國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 34795-2017:這是一個(gè)具體的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定了茂原鏈輪絲菌和天竺鼠來(lái)源的谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶活性檢測(cè)方法。
紫外-可見(jiàn)光譜法:通過(guò)測(cè)定TGase催化反應(yīng)中產(chǎn)生的特定化合物的吸光度來(lái)評(píng)估其活性。
質(zhì)譜法:通過(guò)分析TGase催化的蛋白質(zhì)交聯(lián)產(chǎn)物的質(zhì)譜圖譜來(lái)確定其活性。
使用的儀器還包括酶標(biāo)儀、恒溫箱、高效液相色譜儀、紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)、動(dòng)態(tài)光散射(DLS)儀器、凝膠成像系統(tǒng)、熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)儀器、質(zhì)譜儀等。
選擇我們的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)服務(wù),您將享受到以下優(yōu)勢(shì):
1. 正規(guī)團(tuán)隊(duì):我們的檢測(cè)團(tuán)隊(duì)擁有豐富的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)和正規(guī)技能,能夠?yàn)槟峁└哔|(zhì)量的檢測(cè)服務(wù)。
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GB/T 30987-2020植物中游離氨基酸的測(cè)定
GB/T 34795-2017谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶活性檢測(cè)方法
QB/T 5633.2-2021氨基酸、氨基酸鹽及其類似物 第2部分:L-谷氨酰胺
SN/T 5223-2019蜂蜜中18種游離氨基酸的測(cè)定 高效液相色譜-熒光檢測(cè)法
更多谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)可咨詢工程師,工程師會(huì)根據(jù)不同產(chǎn)品類型的特點(diǎn)、不同行業(yè)和不同國(guó)家的法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)以及客戶的需求,選取相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的項(xiàng)目和方法進(jìn)行結(jié)冷膠檢測(cè)。